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DU 145人前列腺癌細胞傳代及凍存培養信息介紹

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所在地區:湖北 時間:2024-04-10【加入收藏夾】【關閉

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  DU 145細胞是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉移病灶損害中建株的。DU 145細胞和從軟瓊脂中分離到的細胞不具有可檢測的激素敏感性,酸性磷酸酶呈弱陽性。對DU 145細胞及原始腫瘤細胞的亞顯微結構分析可見微絨毛,微絲及細胞橋粒,有許多線粒體,發育良好高爾基體和異質溶酶體。DU 145細胞不表達前列腺抗體。
  
  種屬:人
  
  年齡(性別)男;69歲
  
  組織來源:前列腺;轉移灶;腦癌
  
  生長特性:貼壁
  
  細胞形態:上皮細胞樣
  
  生長培養基:MEM+10% FBS)+1% P/S
  
  培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
  
  傳代步驟
  
  如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
  
  棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次;
  
  加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化;
  
  按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻;
  
  收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。
  
  凍存步驟
  
  細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數;
  
  4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;
  
  將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
  
  細胞用途
  
  僅供科研使用。
  
  智立中特(武漢)生物科技有限公司為您提供,如您想了解更多關于DU 145細胞報價、型號、參數等信息,歡迎來電或留言咨詢。除供應DU 145細胞外,本公司還可為您提供提供進口微生物菌種、各類細胞資源,原裝進口菌種,質粒載體。公司有專業的客戶服務團隊,是您值得信賴的合作伙伴。

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